NEBuilder HiFi DNA Assembly
Sømløs kloning med NEBuilder
Tilsett overlappende PCR fragmenter til røret med den optimaliserte miksen, og reaksjonen for feilfri fragmentsammensetting vil skje uten at det dannes noe innsettingsarr. Denne metoden kan benyttes til å sette sammen enten enkelttrådete oligonukleotider eller DNA-fragmenter av ulike størrelser med overlapp på 15-30 bp. Dette resulterer i et dobbelttrådet og fullstendig ‘sealed’ DNA-molekyl som kan brukes som templat i videre nedstrømsapplikasjoner.
- Spar tid med rask og enkel kloning på så lite som 15 minutter!
- Ett og samme system både for enkle eller større sammensettinger
- Enkelt å tilpasse for ‘site-directed mutagenesis’
- Passer også for fragmenter med mismatch på 5’ og 3’ endene

Disse enzymene følger med reaksjonen og fungerer sammen i samme buffer:
- Eksonukleasen danner enkelttrådet 3’ overheng som bidrar til sammensmeltingen av fragmenter som deler komplementaritet på en ende (det overlappende området)
- Q5 High-Fidelity DNA polymerasen fyller inn tomrommet i hvert sammensmeltede fragment
- DNA ligasen ‘sealer’ nicks i det nå sammensatte DNAet
Kat. nr. | Produkt | Størrelse | Tilbud |
E5520S | NEBuilder HiFi DNA Assembly Cloning Kit | 10 reaksjoner | 2 258,- |
E2623 | NEBuilder HiFi DNA Assembly Bundle for Large Fragments | 20 reaksjoner | 5 865,- |
E2621S | NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix | 10 reaksjoner | 1 903,- |
E2621L | NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix | 50 reaksjoner | 7 613,- |
E2621X | NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix | 250 reaksjoner | 30 454,- |